clp在1.85中起到的化学反应

    CLP术后24h大鼠出现明显腹胀，腹肌紧。沿原切口剖开腹部可闻及恶臭，见原结扎盲肠呈黑色坏疽，肠道粘膜明显充血水肿，肠蟠动弱，腹腔内可见粪便物质，说明腹膜炎模型复制成功.

    预实验取8只大鼠行CLP处理，死t2只，于CLP造模后8h. 16及24h各取2只处死后取心肌进行固定、石蜡包埋、连续切片及HE染色观察心肌病理改变，发现CLP后24h心肌细胞出现疏松、间质水肿、炎症细胞浸润等显著病理变化，故选择24h为该实验观察时间点。

    大鼠处死后迅速分离左心室心肌，置4C冷生理盐水中洗尽血污，分离左心室心肌，于心尖部按与心脏长轴垂直方向连续切取厚度约Imm心肌组织两份，分别用4104%的多聚甲醛(pH=7.4)和FYe戊二醛固定，行光镜及电镜检查:剩余左心室心肌分为两份分装于EP管中保存于一70℃冰箱中待用。53心肌匀浆制备及总蛋白的提取冻存的心肌组织约500mg左右称重，置5倍于组织块重量的预冷的磷酸a缓冲液(PH7.4)中，冰水浴中匀浆10 min,制成20%的组织匀浆，于43x,10000r/min,离心15 min,留取上消液置于·70C备测心肌TNF-a和ET-1.组织称重后置于加有蛋白酶抑制剂和磷酸陇抑制剂棍合液的细胞裂解液中。并用干净的眼科剪于冰浴中将心肌组织迅速剪碎，又于冰上约30分钟.用玻璃匀浆管反复匀浆心肌组织约10分钟，至裂解棍合液成为匀浆为止.将匀浆液移至微离心管，13,000g, 4℃下于低溢离心机中离心15分钟。上请移至新的离心管中分装后置于一700 C保存。